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    膠原酶如何配置及使用方法
  • 發布日期:2023-09-19      瀏覽次數:56
    • 膠原酶的化學名為膠原蛋白水解酶,它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結構,而不損傷其他蛋白質和組織。
      膠原酶的化學本質是一種蛋白質,因此它對溫度、PH和導致蛋白質變性的各種因素均非常敏感,極易受到外界條件的影響而改變其本身的構象和性質。

      配置:
      膠原酶溶液同胰蛋白酶一樣配置、消毒滅菌和儲藏。
      注意:
      因為I型膠原酶分子顆粒比胰酶大,不容易過濾,因此可以用蔡式濾器過濾除菌。
      鈣、鎂離子和血清成分不會影響膠原酶的消化作用,因而可用BSS(如D-hanks或者PBS)或含血清的培養液配置。

      使用方法:
      1、將漂洗、修剪干凈的組織剪成1-2mm左右的小塊。
      2、將組織放入離心管或三角燒瓶中加入30-50倍體積的膠原酶溶液,旋緊蓋子或密封燒瓶。
      3、將燒瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱內每隔3分鐘振搖一次,如能放在37℃的恒溫震蕩水浴箱中則更好。
      4、收集消化液(有時含個別組織塊及沒有充分消化的組織碎屑則需用100目不銹鋼網過濾),離心1000r/min,5min,除去上清,用Hanks液或無血清培養液離心漂洗1-2次,除去上清,加培養液制成細胞懸液,接種培養瓶。

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